Назад
Цели
Недавно было описано применение времяпролетной матричной лазерной десорбции\ионизации (MALDI-TOF MS) (Mass-Fix) в качестве замены иммунофиксации на гелевой основе (IFE). Для клинического использования метода Mass-Fix требовалось наличие подтвержденного автоматизированного метода. Нашей целью было автоматизировать преданалитическую обработку, улучшить идентификацию и эргономику положительных образцов, сократить объем хранения данных на бумаге и увеличить использование ресурсов без увеличения времени обработки.
Методы
Образцы сыворотки были упакованы и загружены в жидкостный манипулятор вместе с реагентами и слайдом для образцов со штрих-кодом. Преаналитические этапы включали в себя:
(1) Бусины для иммунопурификации. (2) Добавление 10 мкл сыворотки. (3) промывка бусин. (4) Выбор иммуноглобулинов (Ig) и восстановление для разделения тяжелых и легких цепей Ig.
Полученный слайд был перенесен на второй малообъемный жидкостный хэндлер MALDI. Затем были собраны масс-спектры MALDI-TOF. Интегрированное программное обеспечение собственной разработки использовалось для отслеживания проб, сбора данных о движении, анализа данных, прослеживания истории и составления отчетов о результатах. С помощью автоматизированной системы было отобрано в общей сложности 1029 образцов сыворотки крови, результаты которых были сопоставлены с предыдущими электрофоретическими результатами.
Результаты
Автоматизированный метод Mass-Fix способен обеспечить соответствие требованиям валидации IFE, порога детектирования (LOD), стабильности и воспроизводимости образца с низкой частотой повторения. Автоматизация и интегрированное программное обеспечение позволили одному пользователю обрабатывать 320 образцов за 8-часовую смену. Программное обеспечение облегчило идентификацию моноклональных белков. Кроме того, процесс поддерживает положительную идентификацию образца, сокращает время ручного пипетирования и позволяет отслеживать образцы без использования бумаги.
Выводы
Mass-Fix готов к внедрению в высокопроизводительную клиническую лабораторию.
