Назад
Ученые обнаружили новый маркер в крови пациентов с Covid-19, который дает представление о течении и развитии болезни и может привести к улучшению диагностики.
Многие инфекции SARS-CoV-2, протекают бессимптомно, тем не менее, инфекции могут вызывать воспаления и изменения свертываемости крови. Более того, врачи наблюдали нарушения иммунной системы у пациентов с Covid-19, с низким количеством лимфоцитов в крови. "Мы уже знали, что существует связь между компонентами свертываемости крови и иммунным ответом", - говорит соавтор работы, опубликованной в журнале Journal of Extracellular Vesicles, профессор Томас Брокер из Биомедицинского центра LMU в Мюнхене. "Но причины и механизмы были в значительной степени неизвестны".
Брокер и коллеги сообщили о роли фосфатидилсерина при Covid-19. Молекула, обычно содержащаяся в клеточных стенках, может иметь важное значение для патофизиологических механизмов, связанных с иммунной системой и свертываемостью крови. И потенциально она также может быть использована в качестве нового биомаркера для прогнозирования тяжести заболевания с помощью анализа крови.
Лаборатория Брокера ранее разработала тест, который выявляет фосфатидилсерин в клетках крови или на их поверхности. В исследовании ученые изучили образцы крови 54 пациентов из регистра Covid-19 (CORKUM) LMU в период с апреля 2020 года по февраль 2021 года. У всех пациентов был Covid-19 различной степени тяжести. Кроме того, исследователи проанализировали образцы от 35 здоровых и 12 выздоровевших доноров. В центре внимания исследования были мононуклеарные клетки периферической крови, такие как лимфоциты и моноциты.
Все иммунные клетки были проанализированы с помощью теста на фосфатидилсерин и разделены с помощью проточной цитометрии. Прибор создавал микроскопические изображения каждой клетки одновременно. На основе файлов изображений исследователи смогли определить, присутствует ли фосфатидилсерин, и где он находится. В результате выяснилось, что иммунные клетки не несут сигнал внутри себя. "Лимфоциты из крови пациентов с Covid-19 были поверхностно нагружены фрагментами тромбоцитов, что мы смогли продемонстрировать на основе сигнала", - говорит Брокер. Тромбоциты, в свою очередь, ускоряют свертывание крови. "И поэтому фосфатидилсерин может функционировать как преобразователь сигнала для дисрегулированных воспалительных процессов или нарушений коагуляции у пациентов с Covid-19; то есть он может запускать типичные для Covid-19 изменения", - полагает ученый.
Измерения также выявили связь между тяжестью Covid-19 и фосфатидилсерином. Повышенные значения во время активной фазы Covid-19 достоверно коррелировали с тяжестью заболевания и в конечном итоге могли привести к улучшению диагностики.
"В качестве маркера фосфатидилсерин превзошел установленные лабораторные маркеры воспалительных процессов в организме, которые в настоящее время используются для клинической оценки Covid-19",
- говорит Брокер. Различные лабораторные параметры в настоящее время используются для классификации и составляют основу шкалы ВОЗ от нуля баллов (здоровый) до восьми баллов (умерший от Covid-19).
Разработанная Брокером система все еще предназначена для исследовательских лабораторий, поскольку очень немногие больницы имеют проточные цитометры с возможностью визуализации. Поэтому исследователи из LMU в настоящее время хотят установить, подходят ли обычные проточные цитометры - такие, которые есть в лабораториях многих больниц - для проведения измерений.
Lisa Rausch et al. Связывание фосфатидилсерин-положительных микрочастиц мононуклеарных клеток периферической крови (PBMCs) классифицирует тяжесть заболевания у пациентов с COVID-19 (аннотация).
Инфекция SARS-CoV-2 ассоциируется с воспалением, включающим тромботические реакции, у многих пациентов с COVID-19. Кроме того, у пациентов наблюдается иммунная дисфункция, характеризующаяся истощением Т-клеток и тяжелой лимфопенией. Мы исследовали распределение фосфатидилсерина (PS), маркера умирающих клеток, активированных тромбоцитов и тромбоцитарных микрочастиц (PMP), во время клинического течения COVID-19. Мы обнаружили неожиданно высокое количество клеток крови, нагруженных PS+ PMP, в течение нескольких недель после первоначальной диагностики COVID-19.
Повышенная частота PS+PMP+ PBMCs сильно коррелировала с увеличением тяжести заболевания. В качестве маркера PS превосходил установленные лабораторные маркеры воспаления, лейкоцитарного состава и коагуляции, используемые в настоящее время для клинической оценки COVID-19. PS+ PMPs преимущественно связывались с CD8+ Т-клетками с экспрессией генов пролиферирующих эффекторных клеток, а не Т-клеток памяти. Поскольку PS+ PMPs несли лиганд программированной смерти 1 (PD-L1), они могут влиять на экспансию или функцию Т-клеток.
Наши данные представляют собой новый маркер тяжести заболевания и показывают, что PS, который может запускать каскад свертывания крови, систему комплемента и воспаление, находится на активированных иммунных клетках. Таким образом, PS может служить маяком для привлечения тромбовоспалительных процессов к лимфоцитам и вызывать иммунную дисфункцию при COVID-19.
